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HITACHI 7060型全自动生化分析仪测光点参数设置中的几个问题
杨海舟，胡昭宇，张碧霞，叶 萍，曹 雁，张 彤
(解放军四十四医院，贵州贵阳 550006)
中图分类号：R446 文献标识码：A 文章编号：1671—7414(2004)05—047—01
日本日本产业株式会社生产的H1TACHI7060型全自动生化分析仪具有准确度及精密度高、检测快速、灵敏、操作简便等特性。我科于2000年购进一台，在使用过程中，我们发现其测光点参数设置中有几个值得注意的问题，现总结如下，供同行参考。
1 在2Point End(两点终点法)、双试剂中的设置仪器是在不同的两个测光点测定所得到吸光度，利用二者差值来扣除样品空白，这样求得待测物浓度的方法即为该生化仪的两点终点法。在双试剂检测中，仪器加第2试剂(R2)是在测光点第16点与第17点之间，为了提高结果的准确性，第一测光点应设置在第17点之前，即在加入R2之前，第1试剂(R 1)之后。这时的生化反应一般还未启动，这样，就能有效消除样品的色索以及溶血、脂浊、黄疸的光谱干扰。一般设置在第16点似更为恰当，因为在大多酶促反应中，第一试剂中缺少部分工具酶或底物，可以在第一孵育期内充分消除内源性干扰，加R2才启动酶促反应，这时，就有效避免了酶促反应中的内源性干扰。
2 在Rate A(速率法A)中的设置酶与底物混合后需要有一定的时间让酶被激活，直到线性反应期才能开始监测，有的项目需要用工具酶将内源性代谢产物耗尽。一般单试剂只需30 S，常用项目中ALT、AST与CK—NAC需要特别注意。ALT与AST试剂盒说明书上都说是60 S，这用于正常人的血清已足够，可是大量内源性酮酸增加的情况很多，虽然试剂里有过量的乳酸脱氢酶，但是大量酮酸在60 S内仍不能完全消除，监测期内剩余的酮酸会被当作ALT或AST，所以延滞期应增加到90 S到120 S。HITACHI7060生化仪两个相邻测光点间的时间约为19．7 S，所以单试剂起始测光点以第6点左右为宜，双试剂以第22点左右为宜。CK—NAC试剂中工具酶的数量较多，酶被逐个激活需较长时间，所以应以延长至约180 S时的测光点作为第一测光点为宜。类似情况在生化反应中还有一些，我们一定要根据实验反应原理，结合样本中可能出现的干扰因素等情况，全面考虑，恰当选择测光点，以提高检测的特异性与准确性。

3 在反应时间上有特殊要求的项目中的设置 如目前最常用的Jaffe反应法测定肌酐时，由于其特异性不高，血、尿中的维生素C、丙酮酸、丙酮、葡萄糖、蛋白质等许多化合物也能与碱性苦味酸盐生成红色物质，这些非肌酐色原性物质有两类：一类为快速反应假肌酐物质，在样品与碱性苦味酸混合后20 S内迅速出现反应，产生非肌酐性的有色化合物。测定时设置20 S延迟期，可以排除此类干扰。另一类为慢速反应假肌酐物质，一般在样品和碱性苦味酸混合后8OS到100 S才开始反应。这样在20 S到80 S之间，出现“窗口期”。此时肌酐与苦味酸的呈色反应占主导地位。有研究者发现，“窗口期”上限为60 S口](叶应妩，王毓三．全国临床检验操作规程．第2版．南京：东南大学出版社，1997：334)。为了提高检测的特异性，我们特选择使用HITACHI7060型生化仪提供的2 Point Rate(两点速率法)来检测肌酐，测光点设置在试剂与样本混合后(双试剂即为加入R2后)第25到第60 S之间为宜。又如，血清白蛋白BCG染料结合法为即时反应，30 S后n球蛋白、转铁蛋白、触珠蛋白也将出现呈色反应，所以其测光点应设置于30 S左右的位置，不能任意延长时间，这样，既可以提高检测的特异性，又可以提高仪器检测的效率。
4 系数K值较大时的设置 系数K值对酶的测定十分重要，过高虽然测定线性较宽，但重复性差，这与仪器测定的噪音有关。日本7060型自动生化仪吸光度噪音一般控制在0．001左右。如K值为8000，每分钟测定吸光度如有0．001微小变化，根据上式，结果将出现8 U／L的误差，这对于一些参考值较低的酶如转氨酶来说显然太大。这时，我们可以将测光点间的时间由1 rain延长到2 rain，此时，0．001噪音对每分钟测定吸光度误差将减少一半。也就是说，对较大的系数K值，我们可以根据实际情况适当地延长测定时间．合理设置测光点，以减小误差。

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