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[求助]180生化重复性不好,针对AST和ALT

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林星海 发表于 2009-9-12 10:52 | 显示全部楼层 |阅读模式

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各位前辈请指点迷津!新手上路

这台180生化使用已有三年左右了,遇到AST和ALT的重复性不是很好,且有一段时间了。于是我去看时,首先看它的曲线,它的曲线虽说不是一条十分光滑的直线,但已相当接近了,就是一段直线过后,另一条直线稍微比前一条下些,相差不大,而后又比前一条稍微向上些,也是相差不大,因此我认为此曲线是平滑的。于是,我想光路没问题,那就是出在水路上,便把进样针,清洗单元的针都清洗了一遍,结果依旧不行。注射器,电磁阀都不存在问题,搅拌器工作也正常。比色杯里水也不存在吸收不干净的问题。之后,我用洗耳球吹滤光片,又做了四次重复试验,结果是AST 36、25、22、25,前三次的结果都是第一个与后三个中的最低一个相差15个,ALT稳定,但最后一次时,AST稳定,而ALT最后一个却与前三个相差了11个,犹如15、16、14.5。

我现在都不知道这个是光路出了问题还是试剂上有没有什么问题,希望高人能指点下,谢谢了!!!!


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顶风 发表于 2009-9-12 12:56 | 显示全部楼层
只有这两项重复性不好吗?其他项目如何呢?
 楼主| 林星海 发表于 2009-9-12 15:49 | 显示全部楼层

是的,只有两项的,其他的都还稳定!我现在不知道曲线我观察的是否正确?那样的应该算是曲线还可以吧!

顶风 发表于 2009-9-12 18:09 | 显示全部楼层
这两项的试剂是非常稳定的,修生化的时候一般先看这两项的重复性来判断一下是试剂的问题还是机器的问题,这两项不好了,其他项目的结果基本上就没法看了。而你的机器偏偏是这两项不好,那很可能就是试剂方面的问题。
 楼主| 林星海 发表于 2009-9-12 21:52 | 显示全部楼层
我不知道如果滤光片有问题,会不会也会引起这个呢?AST和ALT的波长不是为340和510 吗,如果340的波片有灰尘什么的,会不会造成这个问题呢?
顶风 发表于 2009-9-13 08:20 | 显示全部楼层
不会的,如果滤光片有问题,那所有的结果都不好,而不是重复性不好了。
岳世海 发表于 2009-9-18 09:54 | 显示全部楼层

重点查看S注射器,因为这两项样品量大,拉低注射器,检查密封性,清洗样品系统管路。

可以再将第二波长改为450试试看。

 楼主| 林星海 发表于 2009-9-20 19:56 | 显示全部楼层

谢谢两位老师对我帖子的关注!他们尝试着换过试剂了,可是还是不行。

因为我是检查过样品针的,样品针,试剂针无挂水,样品针注射器的TIP头也是我新换的,绝对不会存在气密性不好的问题。样品针我也是用84通过的,所以我也不怀疑他了。我准备换个通道试试看,

不知道前辈们是否有更好的意见呢?请多多指导我这新手,虚心求教!!!

燃情岁月 发表于 2009-9-20 21:09 | 显示全部楼层

就我的经验(基本没什么经验)ALT、AST CV不好,第一个出高值 ,我碰到的全是样本TIP磨损打滑和样本针不畅造成。

另外酶类的对温度要求非常高的,看看反应盘温度稳不稳。

ALT、AST都是紫外的项目,对灯光强度的稳定(灯电压)和滤光片洁净及滤光轮步进电机旋转都有关。

ps,说个无关的:曾经听说过一台机器搅拌不好,造成除了ALT、AST,其他项目的CV值都不好,百思不得其解,最后想通,是因为这两个项目样本量大,加样的时候,压力使比色杯中溶液适当的混匀了,呵呵。

zhangyouquan200 发表于 2009-9-20 23:53 | 显示全部楼层

首先,仪器使用3 年了,有没有更换过灯泡?灯泡寿命快到期,首先表现在,340nm波长上,会造成吸光度波动等现象。

其次,您对反应曲线的描述我不是很明白。数据有没有报警的现象发生?在ALT、AST 读数范围内有没有设置线性度检查?或把反应曲线图放大,看看在读数点范围内反应曲线的是不是比较直,整个反应曲线有没有跳点的现象发生?

再次,做的重复性实验的反应曲线有没有放在一起对比其差异?

最好能把曲线传上来,大家一起琢磨。

杨洋 发表于 2009-9-21 00:09 | 显示全部楼层

UREA 这个项目好不好?

电子干扰?

zhangzq 发表于 2009-9-25 16:23 | 显示全部楼层

灯泡引起谷草谷丙出问题的概率非常高。使用时间长了紫外部分出问题了的可能性比较大。

另外就是把测量时间延长一下试试看?调整一下试剂的测光时间看看有效不?

 楼主| 林星海 发表于 2009-9-27 21:32 | 显示全部楼层

谢谢各位老师的指导。由于这段时间也没来得及去维护那台仪器,所以一直没处理。我想我现在要针对的是那台仪器要从以下几个方面试试看:1、他的搅拌器清洗是否干净;2、IRU的温度(这个我看过他的进程中显示过一次,温度低的代码,但就只有一个项目的,其他的没有。也不是每次都有,只是偶尔,想这个问题,要这么去调他的呢?)3、比色杯的空白值;4、由于我对图形判断不是很好。所以我也不敢说很好。但也不敢说很坏。再者没有相机拍下。

他的样本针是用巴士和针通过的。应该没问题的。就是灯泡和试剂针了。

 楼主| 林星海 发表于 2009-9-27 21:33 | 显示全部楼层
但是,不是只要灯炮做比色杯检测时能通过切值在2000左右,应该就是没什么问题啊。
 楼主| 林星海 发表于 2009-9-27 22:15 | 显示全部楼层
UREA倒是满好的!
LIXM 发表于 2009-10-7 20:20 | 显示全部楼层
我们用chemix180二年多,同样是ALT和AST的重复性不好,应该不是机器的原因,因为机器安装不久我就对所有项目做了重复性试验,除了这二项其它都不错,这几年我用过长征、科华、3V、威生曼等都存在重复性不好,不知是何原因?
tangjianliu 发表于 2009-10-15 20:09 | 显示全部楼层
参数发上来
tangjianliu 发表于 2009-10-19 11:38 | 显示全部楼层

把参数发上来

风·雅·颂 发表于 2009-10-19 13:40 | 显示全部楼层
关注中
LIXM 发表于 2009-10-19 20:03 | 显示全部楼层
上海科华试剂

Method

ALT

AST

unit

U/L

U/L

Assay Type

Rate

Rate

Measuring Range

1:

0-0

0-0

2:

17-23

17-23

Wave length

Prim(nm)

340

340

secd(nm)

415

415

Sample volume(ul)

20

20

R1  Volume(ul)

200

200

R2  Volume(ul)

100

100

Normal Range

0-42

0-37

resolution

0

0

Technical Range(conc)

0-1000

0-1100

Technical range(abs)

-2.5-2.5

-2.5-2.5

Instrument factor  a

1

1

Instrument factor  b

0

0

Calculation

Straight

straight

Conc.

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