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[讨论]试剂量和样本量同比例增加或者减少对结果有何影响?

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问天何辜 发表于 2009-8-17 09:29 | 显示全部楼层 |阅读模式

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我用的是日本7080仪器,有时候做的时候试剂说明书上的量有可能超过R1的最大量,那时候就要求同比例减少试剂量和样本量。

那比如ALP:说明书上说是R1:250.R2:50.S:5     然后做的时候同比例减少为:R1:200.R2:40.S:4.

这样的话做的TEST能增加。不知道大家其他的试剂有没有这么做过,有没有考虑过这样做对结果有何影响?(一般认为应该对实验结果没什么影响,只是量越大误差应该越小吧?)

接下来我会做一些比较试验,实验前想先请教下各位老师,谢谢~!


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小东 发表于 2009-8-17 23:18 | 显示全部楼层
其实这种做法自从有了全自动生化仪的时候就存在啦,但是这只限于咱国内的情况,因为很多仪器通道都是开放的,以日本为代表,试剂厂家也就随之出来很多,有些小厂家不是很严格的给出每一个机型的参数表,而只给出手工操作的步骤,导致了楼主所说问题的出现。严格的说这应怪罪于试剂厂家,但是有些出于成本考虑的实验室想用这样的试剂也可以,但严格的说您要做试剂评价实验,如重复性、线性、最低检出限、稳定性(如抗溶血、黄疸等)。因为您降低了总体反应体积对于仪器的状态要求就要高一些。例如加样精度、比色杯质量、仪器交叉污染情况等等。只有实验数据才能证明您的做法可行与否,才能证明您的仪器在不影响结果质量的前提下,可以做到的最小总反应体积是多少,当然这也有赖于您所用试剂质量的好坏啦,总的来说还是做做实验的好,自己也放心一些。
 楼主| 问天何辜 发表于 2009-8-18 10:38 | 显示全部楼层

恩,谢谢小东老师~!

iceearth 发表于 2009-8-21 10:56 | 显示全部楼层
只要没有超过仪器的最小反应体积,以及样本/试剂的加样范围,对结果都没有什么影响。
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