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[求助]CX5 HbA1c的参数问题,定标失败!

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yaoyajun 发表于 2009-2-9 02:54 | 显示全部楼层 |阅读模式

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一个糖化血红蛋白在CX5上的参数,老提示定标失败,不知道错在哪里,请高手帮忙指点,不过俺没有金币可赠,只有空感谢!

反应特性:试剂1+样本,3-5分钟,读空白吸光度1,然后加试剂2,反应5分钟读吸光度2,进行计算。定标类型,4参数对数曲线,定标点:5点(空白+4个标准液)

主要参数如下:

Reaction type: endpoint 2

reaction direction: positive

math model: 1

No. of calibrators:5

calibrator 1: 0.00

              2: 4.30

              3: 8.10

              4: 14.20

              5: 22.40

              6: 0.00

primary wavelength: 340

secondary wavelength: 700

 

reagents (primary inject): [A] vol:200 ul    [NONE] vol: 0 ul

reagents (secondary inject): [B] vol: 40 ul       Add time: 592 sec

sample volume: 8 ul

 

reagent blank:                  reaction:

-----------------               --------------------------

start read: 500 sec            start read: 600 sec

end read: 540 sec              end read: 640

 

substrate depletion:

           initial rate: 99.999   delta abs: 1.500

multipoint span

1-2:  0.000

2-3:  0.000

3-4:  0.000

4-5:  0.000

 

recovery/sensitivity

std dev (conc): 0.00

cv(%): 0.00

std dev (mA): 0.00

threshold: 9999.99

 

定标结果在 5个Reaction的吸光度后面都有一个“*”

 

提示:

-----------------------------------------

FAILED CALIBRATION (*)

LEVEL  CONDITION  MAGNITUDE

1         SPAN           0.08637

2         SPAN           0.10187

3         SPAN           0.10433

4         SPAN           0.05293

5         SPAN           034550

 

请高手帮忙看看啊,谢谢!谢谢!


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刁乃珍 发表于 2009-2-9 11:52 | 显示全部楼层
定标结果第四点吸光度比之前的低
 楼主| yaoyajun 发表于 2009-2-9 15:49 | 显示全部楼层

谢谢刁乃珍!你所说第四点指的是报警的数量级。实际的吸光度检验结果还是符合的趋势的。如下:

 

Cal Lev       blank              reaction

1              0.01165           0.39130

2              0.04685           0.34013

3              0.04778           0.23918

4              0.04552           0.13259

5              0.04694           0.08108

 

 

周谨 发表于 2009-2-9 16:01 | 显示全部楼层

reaction direction: positive

Cal Lev       blank              reaction

1              0.01165           0.39130

2              0.04685           0.34013

3              0.04778           0.23918

4              0.04552           0.13259

5              0.04694           0.08108

calibrator 1: 0.00

              2: 4.30

              3: 8.10

              4: 14.20

              5: 22.40

              6: 0.00

 楼主| yaoyajun 发表于 2009-2-9 19:43 | 显示全部楼层

谢谢。

工作曲线是一个反S形的4参数logit-log函数,的确是随浓度升高吸光度减低的。

就单个反应而言,是正向的,随时间延长,吸光度递增。

 楼主| yaoyajun 发表于 2009-2-10 14:02 | 显示全部楼层

等待指点中......

lishi8302 发表于 2009-2-23 08:56 | 显示全部楼层
数计模式1好像是正方向的S影图像吧!
andyli1981 发表于 2011-1-23 04:54 | 显示全部楼层
吸光度怎么越来越低呢?是不是标准品放错了?
TerenceTracy 发表于 2011-1-24 14:50 | 显示全部楼层
用SPLINE,不要用LOG。
随风而过 发表于 2011-1-24 15:23 | 显示全部楼层
是不是反应方向搞错了?我以前增加新的项目的时候,就有一样把反应方向搞反了,复查试剂说明书才发现!!!但不是贝克曼的仪器,我想都是万变不离其宗吧!!!
凯迪 发表于 2011-1-24 20:47 | 显示全部楼层
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