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[原创] 生化分析仪速率法计算过程详解

 火... [复制链接]
小东 发表于 2020-12-7 23:21 | 显示全部楼层 |阅读模式
本帖最后由 小东 于 2021-3-18 17:03 编辑

很早以前我写过两点终点法的计算过程,今天有兴致给大家分享一下速率法的计算过程,如下:


如上图,是一个校准品的测定曲线,蓝色区域为测光区,吸光度的计算是用最小平方法得到测光点30与45之间每分钟吸光度的变化量
我们将30点至45点中各个点吸光度值与时间列表如下

上图是以D模块举例,各测光点的在整个测定过程中的时间在维修手册中可查,厂家给定原始数据都是按秒计算的,但是真正用于计算时是按分钟计算,所以表格中我给换算成分钟来体现时间了。通过各点时间(分钟)与各点吸光度值来作图,用最小平方法也就是excel中线性作图的功能计算出线性方程式,其中斜率-237.87就是我们用于计算的每分钟吸光度的变化率。与第一张图中仪器计算出的-238一致。

按以上步骤通过测定空白水和标准品得到如上图的标准曲线,其斜率的倒数放大1万倍得到-48101用于结果计算。
至此校准结束。
下面贴两张实测标本图,便于大家计算

由上图得到该测定吸光度变化率-198.7减去S1abs:-2再乘以K:-48101得到94.7这个结果。




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小锁学维修 发表于 2020-12-9 15:45 | 显示全部楼层
看了一遍,没懂,再研究下
xuyubin-SH 发表于 2020-12-9 18:02 | 显示全部楼层

谢谢分享
 楼主| 小东 发表于 2020-12-9 22:24 | 显示全部楼层
小锁学维修 发表于 2020-12-9 15:45
看了一遍,没懂,再研究下

这张图看明白了就基本上明白了

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luobacl 发表于 2020-12-11 09:57 | 显示全部楼层
谢谢分享
小锁学维修 发表于 2020-12-14 15:31 | 显示全部楼层
小东 发表于 2020-12-9 22:24
这张图看明白了就基本上明白了

横坐标分钟,纵坐标吸光度,斜率就是吸光度?拟合曲线就是线性是吗?
13723310170 发表于 2020-12-18 15:49 来自手机 | 显示全部楼层
这个用斜率计算出K值没弄明白
 楼主| 小东 发表于 2020-12-20 15:50 | 显示全部楼层
小锁学维修 发表于 2020-12-14 15:31
横坐标分钟,纵坐标吸光度,斜率就是吸光度?拟合曲线就是线性是吗?

斜率就是用于计算的吸光度的变化率。其余你理解的都对。
 楼主| 小东 发表于 2020-12-20 15:54 | 显示全部楼层
本帖最后由 小东 于 2021-3-18 17:05 编辑
13723310170 发表于 2020-12-18 15:49
这个用斜率计算出K值没弄明白

仪器显示的K值是仪器校准曲线的斜率的倒数放大1万倍。
小锁学维修 发表于 2020-12-21 14:06 | 显示全部楼层
本帖最后由 小东 于 2021-3-18 17:05 编辑
小东 发表于 2020-12-20 15:54
仪器显示的K值是仪器校准曲线的斜率的倒数放大1万倍。

好的好的,谢谢了
13723310170 发表于 2020-12-21 16:57 来自手机 | 显示全部楼层
好的,谢谢
all-in 发表于 2020-12-22 12:32 | 显示全部楼层
谢谢分享
LEAVES 发表于 2020-12-26 17:14 | 显示全部楼层
学习了,谢谢
shanshangshan 发表于 2020-12-27 15:49 来自手机 | 显示全部楼层
学习了
 楼主| 小东 发表于 2021-1-24 15:35 | 显示全部楼层

速率法的测光区间理想化都是酶促反应线性期,我们将各点拟合成一次函数而得到的斜率作为变化率用于计算,严格说不只是一次函数那么简单,需要用到最小二乘法求得线性回归方程。
wanyi1016 发表于 2021-1-24 19:46 | 显示全部楼层
LEAVES 发表于 2021-2-5 13:15 | 显示全部楼层
感谢分享
有情 发表于 2021-2-9 23:27 | 显示全部楼层
讲得很好
LEAVES 发表于 2021-2-15 14:31 来自手机 | 显示全部楼层
感谢分享,学习了
w金泽 发表于 2021-2-17 23:07 | 显示全部楼层
学习了 了
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