DiaSys FE-2粪便分析工作站的临床应用
许建邦 邝桂星
作者单位：510260广州市，广州医学院第二附属医院（许建邦）；511442广州市，番禺南村医院（邝桂星）；
【摘要】 目的 评价DiaSys FE-2粪便分析工作站的临床应用价值。 方法 对503份粪便标本用直接涂片镜检法、加藤氏玻璃纸厚层涂片法、FE-2工作站法进行肠道寄生虫检查。 结果 FE-2工作站法较直接涂片法虫卵检出率提高5.55倍，较加藤氏玻璃纸厚层涂片法虫卵检出率提高4.87倍；对蛔虫卵检出率提高10倍、鞭虫卵、钩虫卵检出率提高5倍，华支睾吸虫卵检出率提高4.5倍。 结论 FE-2工作站设计新颖、标准定量，准确可靠，操作简便、卫生环保，能有效提高肠道寄生虫检出率，是一台适用于肠道寄生虫病防治的实用性仪器，值得推广使用。
【关键词】 粪便检查；寄生虫病
DiaSys FE-2粪便分析工作站（简称FE-2工作站）是用于临床实验室体外诊断，能把任何标准的立式显微镜升级为全自动的粪便显微镜分析系统，应用于肠道寄生虫卵、幼虫、原虫、球虫卵囊、细胞、食物残渣的检查。长期以来，由于粪便有形成份形态学检查方法滞后，直接地影响肠道寄生虫病防治工作，尽快提高寄生虫卵检出率已成为临床实验室急需解决的课题。最近我们应用一种新的检查系统——FE-2工作站作粪便标本中寄生虫分析、效果的满意。现介绍如下：
材料和方法
一、标本来源
随机采集2003年5月广州市番禺区南村镇12间小学校师生503人，其中小学生481人（男251人、女230人），年龄6~13岁，平均9.5岁；教职工22人（男15人，女7人），年龄21~60岁，平均35岁。
二、材料
1． 仪器
1.1 载玻片
1.2 玻璃纸（Cellophane），具吸水性。
1.3 奥林匹斯光学显微镜（CH 30型）。
1.4 DiaSys FE-2粪便分析工作站（U.S.A DiaSys Corporation生产•广州华鑫科技有限公司提供）。
1.5 Parasep®粪便寄生虫离心器（U.S.ADiaSys Corporation生产•广州华鑫科技有限公司提供）。
2． 试剂
2.1 生理盐水。
2.2 浸泡液（3%马拉凯绿6ml，甘油500ml，6%石炭酸500ml）。浸泡玻璃纸用。
2.3 10%甲醛盐水。
2.4 乙酸乙酯（分析纯）（天津化学试剂厂）。
2.5 碘染色液（U.S.A DiaSys Corporation提供）。
三、检验方法
1．直接涂片镜检法[1]。
2．加藤氏玻璃纸厚层涂片法[2]（简称加藤氏法）。
挑取3个不同部位粪便标本约100mg均匀涂布在载玻璃片上，用经浸泡液浸泡的大小适中玻璃纸复盖，再用橡皮塞轻轻按压标本，使之均匀铺开又不致逸出，置室温25℃，湿度<75%条件下静置1h左右镜检。
3． FE-2工作站法[3]。
3.1 粪便浓缩液制备。
3.1.1 在Parasep®粪便寄生虫离心器中挑取新鲜粪便一匙（约1g）于6ml容量的混合室内，加入10%甲醛盐水2.7ml，乙酸乙酯0.8ml，封闭混合室。
3.1.2 接上3.5ml容量的离心管，拧紧，管尖朝上，旋转振晃或振荡使其乳化。
3.1.3 以相对离心力（RCF）500G（相当于水平式离心机半径160mm时转速1670r/min）
离心5min或RCF 1000G（相当于水平式离心机半径160mm时转速2360r/min）离心1min。
3.1.4 除去脂肪物质并倒掉沉渣上层液体，余下约800ul的浓缩物用于检验。
3.2 FE-2工作站操作步骤：
3.2.1 正确安装工作站（流动计数室安置在显微镜载物台上，固定好连接管道、调整好吸样针到距离心管底部1~2mm处固定好），检查试剂，接通电源。
3.2.2 按未染色冲洗键，同时启动电源，仪器进行自检。完成后，指示灯均亮。
3.2.3 将吸样针插入粪便浓缩物离心管中。
3.2.4 按“进样”键，5 Sec内，有15ul粪浓缩物被自动吸入到流动计数室中（其中：未染色计数池有粪浓缩物10ul，染色计数池有粪浓缩物5ul及染色液5ul）。
3.2.5 在显微镜下或显示屏上读取结果。
3.2.6 观察完毕后，按“未染色冲洗”键，8 Sec内自动吸入生理盐水1500ul冲洗未染色计数池及管道；再按“染色冲洗”键，8 Sec内自动吸入生理盐水1800ul冲洗染色计数池及管道，冲洗液均返回离心管中。
3.2.7 冲洗完成后，键上指示灯均闪亮，表示可进行下一样本检测或另一次清洗循环。
3.2.8 当测试暂停一段时间后，循环冲洗2~3次，并用75%酒精擦拭吸样针针头。
四、结果判断
显微镜下检出或在显示屏上检出肠道寄生虫卵，幼虫、原虫，球虫卵囊，细胞，食物残渣为阳性。
结 果
1．同一标本肠寄生虫卵检出率，FE-2工作站法最高，较直接涂片法高5.55倍，较加藤氏法高4.87倍（见表1）。
2．FE-2工作站法对农村小学校503位师生寄生虫感染率调查表明：总感染率7.754%（39/503）,儿童感染率6.445%（31/481），成人感染率36.364%（8/22）；男性感染率7.29%（21/288），女性感染率7.91%（17/215）；虫种分布上，以华支睾吸虫最多，感染率3.579%，次为蛔虫，感染率1.988%，鞭虫与钩虫相仿，感染率均为0.994%，痢疾阿米巴原虫最少，感染率为0.199%。（见表2）。
讨 论
DiaSys FE-2工作站是美国DiaSys Coropration根据NCCLS（美国临床检验标准委员会）和CLIA（临床实验室改进法案）导则的要求研制，经TÜV Pheinland（德国莱茵机构）确认，已在全世界各国实验室广泛应用的产品。它是由获得专利的高清晰度优质玻璃制成的双流动计数室，可调双加样器，微电脑控制台，自动染色装置，带摄像多功能显微镜，电脑系统组成。与Parasep粪便寄生虫离心器同时使用。杨振华教授在网上新试验、新方法专栏上曾作专题介绍[4]。我们在临床应用过程中，有如下几点体会：
1．提高虫卵检出阳性率：通过采集较多粪便（约1g），经用甲醛固定保持寄生虫卵、原虫、幼虫、细胞形态和结构，用乙酸乙酯加速粪便物质破坏释放出虫卵、幼虫，再经过滤和离心处理，取15ul粪便浓缩物作不染色和染色的定量检查，大大提高虫卵和其它病理成份检出率。本组随机抽样粪检503份标本结果表明，FE-2工作站法对虫卵的检出率，较直接涂片法提高5.55倍，较加藤氏法提高4.87倍。
2．视野清晰：流动计数室是用优质玻璃，厚度按国际标准整块制成，光洁平整，无任何缝隙，提供清晰明亮视场，标本经Parasep离心器上滤网过滤，除去粪渣的大分子，仅通过<425um的微粒、背景清晰。
3．自动染色：每次定量吸入粪便浓缩物15ul后，其中10ul不染色，另5ul与5ul染液自动染色，染色后，虫卵及原虫包囊结构及清晰易辩，淀粉颗粒染呈紫蓝色，分解为糊精的淀粉颗粒染呈红色。有利于鉴别。
4．操作简易：操作者只需按指示灯提示的按钮，工作站即自动完成吸样，定量标本输送，重悬浮、染色、自动摄像、自动冲洗、自动打印报告……等全部过程。仪器还具有自检功能，当出现故障时可自动报警并提示处理方法。
5．速度快捷：除标本前处理及离心时间外，自动吸样时间5 Sec，自动冲洗时间8 Sec便可完成。
6．安全环保：标本在ParaSep粪便离心器中加甲醛盐水起到固定、消毒、除臭，加乙酸乙酯乳化脂肪，破环粪便结构，防止爆炸危险的作用。标本经无害化处理后在分析全过程都在封闭管道系统中进行，完全达到安全环保目的。
7．减轻劳动强度：标本处理过程中的振摇、加样、冲洗等步骤由仪器代劳，粪沉渣有形物质通过内置数码位相差显微镜在显示屏观察到平面结构和立体结构图像，结果及报告用键盘操作、减轻工作人员劳动强度和视力疲劳。
8．适用于医、教、研：仪器设计较完善的软件功能，除满足临床粪检诊断和鉴别诊断需要外，还可以采集和贮存有价值的寄生虫卵、原虫、细胞、结晶、食物残渣图谱，供教学、科研用。
我们认为：DiaSys FE-2粪便分析工作站在沿用粪检方法基础锐意创新，提供一种新方法，有良好社会效益和经济效益，值得重视和推广使用。
参 考 文 献
1 叶应妩,王毓三主编. 全国临床检验操作规程.第二版.南京;东南大学出版社,1997.140.
2 周友泉.寄生虫卵检查新方法（加藤氏玻璃纸厚层涂片法）.医学检验信息网,https://www.clinet.com.cn.
3 杨振华.粪便标本中寄生虫分析.检验医学信息网,卫生部临床检验中心,中华医学会检验分会,临床检验管理专业委员会,https://www.clinet.com.cn/新试验新方法专栏.htm.
4 DiaSys Corporation a diagnostic Systems Company. Instruction Manual & Technical Specifications FE-2 U.S.A 2001. |
