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[求助]PCR荧光检测仪故障

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李玉宽 发表于 2010-3-29 20:56 | 显示全部楼层 |阅读模式

仪器:西安天隆TL998A型(属终点荧光检测,现已淘汰,但目前医院仍在使用)。购于05年,主要用于测定乙肝DNA病毒定量,近三年一直使用上海申友生物科技公司生产的试剂。近期故障表现如下:

无论测标本还是阳性对照,荧光值始终局限在一个很小的范围40左右。10E4、10E5、10E6(10的次方)对照基本在同一个水平。换了不同批号的有效期内按要求保存完好的试剂反复测试也是如此,扩增仪性能良好,温度变化及各项参数符合要求。调整检测仪增益时,荧光值同步增大或缩小。有一点不能确定,每次发试剂时都是前一天下午发,第二天到货,途中使用冰袋降温保存,试剂要求-20℃冻存,不知会不会在此过程中TAQ酶活性丧失或减弱。由于没有其它仪器做对比,没法判断是试剂原因还是仪器故障。请有这方面经验的朋友指教。

这里还有一篇关于PCR原理的幻灯,与大家分享一下

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李晓清 发表于 2010-10-31 21:36 | 显示全部楼层
我估计还是光路方面出了问题,首先检查检测器与发光部位是否对准,如果对准,可能为检测器故障。
ljh1998 发表于 2022-5-28 19:40 | 显示全部楼层
谢谢分享
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