[原创] 贝克曼原厂试剂反应曲线2

郑振寰 发表于 2014-11-8 20:55
 AU 曲线分析
AU的曲线与遗留机型大致相同,稍微的区别是8系列AU机型将R1分为R1-1和R1-2,类似变为三试剂。但实际上,加注顺序是这样的,R2-1先加入,然后加入R1-1,读取P0点,接着加入样品读取P1点,在P10点之后加入R2,读取P11点。这样的设计可能是为了迎合为DXC这样的机型设计的试剂使用,将R1的某些不宜长时间保存在一起的成分分开保存,使用前再加入。
以前很少见到官方试剂的反应监测图,所以在设计两点终点法时,我都会采用两组读点,也就是Measuring Point-1 和Measuring Point-2都用上,Measuring Point-1是主读点,我一般设为0-27;Measuring Point-2为空白读点,我一般设为0-10;后来是位厂家的工程师告诉我这么做其实就是10-27,没必要如此麻烦。想想也是,后来设置的时候,都只设置Measuring Point-1的10-27。但今年看到官方的反应监测后才知道,原来我的做法是对的,但也无法说出后来的做法有什么不对,毕竟通过公式推导后,结果是一样的。
AU的反应方法有三种:
End终点法,减去试剂空白;还有一个End1选项,不是减去试剂空白,而是减去水空白,就是光度计校准里得到的水空白值。
Rate速率法,减去试剂空白;还有一个Rate1选项,不是减去试剂空白,而是减去水空白,就是光度计校准里得到的水空白值。
Fixed固定点法,减去试剂空白;还有一个Fixed1选项,不是减去试剂空白,而是减去水空白,就是光度计校准里得到的水空白值。
这就是为什么有些反应监测里没有试剂空白参数的原因。相比较试剂空白来说,水空白更为稳定些,毕竟最少每周都要监测一次。

Alanine Aminotransferase (ALT) 丙氨酸转氨酶
P10和P11点由于加入R2启动反应时间,所以有些波动,迅速向上抬起。从P11到P27有稳定的向下反应直线。这是正常的反应曲线。 P11点之前的虚线是因为P10之前的所有溶液体积小于最低反应量,例如最低反应量是120ul,但在P11点之前就会计算这个量,如果R1+S+稀释液的量不足120UL,但后面的R2加入后够了的话,前面11个点的曲线就是虚线。
AU480/AU680/AU2700/AU5400/AU5800的副波长为660nm,AU400/AU600/AU640的副波长为380nm。
试剂稳定期30天,试剂空白稳定期7天。
对温度波动和细菌污染敏感。
同主波长项目:AST, CK, GLU, LDH, PHOS, BUN。
同R2分配灵敏度:AST, CK, TP, TRIG, UA。
同样温度敏感项目:所有酶、CREA,HDL-C。
同样细菌污染敏感项目:AST, ETOH, LIP。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Albumin (ALB)白蛋白
单试剂,P11点无明显变化。该项目反应时间极短,注意P11点后的反转波动。
同样是单试剂项目:HDL-C, IRON, UCSFP。
同样微量样品进样的项目:AMY, CHOL, GLU, LIP, MG, TRIG, UCSFP, serum proteins。
同样R1分配灵敏度的项目: AMY, CALA, CO2, DBIL, TBIL,CHOL, MG, UIBC, UCSFP。
试剂稳定期90天,校准稳定期30天。


这里插一句,上面的图示AU系列自带打印机打印机的原始结果报告,估计遍这本书的人编写DXC习惯了,忘记了AU反应监测给出的信息相当多,足够分析问题了。每一张曲线都给出了这种原始结果报告。我把后面的相关内容都删掉了,反应监测就足够了。


Alkaline Phosphatase (ALP)碱性磷酸酶
试剂稳定期14天(AU5800只有7天)。试剂空白稳定期14天。
相同主波长项目: AMY, GGT。
相同温度波动敏感项目:所有酶、CREA,HDL-C。
更换一次试剂,将会导致质控值波动超过10%。
质控测试前,室温稳定1-2个小时。在仓试剂过长,会因二氧化碳影响试剂成分。出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Amylase (AMY)淀粉酶
试剂稳定期30天,校准稳定期7天,单试剂。
相同主波长项目:ALP, GGT。
相同微量样品分配灵敏度项目:ALB, CHOL, GLU, LIP, MG, TRIG, UCSFP, serum proteins。
相同R1分配灵敏度项目:ALB, CALA, CO2, DBIL, TBIL,CHOL, MG, UIBC, UCSFP。
相同温度波动敏感项目:所有酶、CREA,HDL-C。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)


Aspartate Aminotransferase (AST) 天门冬氨酸氨基转移酶
AU480/AU680/AU2700/AU5400/AU5800的副波长为660nm,AU400/AU600/AU640的副波长为380nm。
试剂稳定期30天,试剂空白稳定期7天。
对温度波动和细菌污染敏感。
同主波长项目:ALT, CK, GLU, LDH, PHOS, BUN。
同R2分配灵敏度:ALT, CK, TP, TRIG, UA。
同样温度敏感项目:所有酶、CREA,HDL-C。
同样细菌污染敏感项目:ALT, ETOH, LIP。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Bicarbonate (CO2)二氧化碳

试剂稳定期7天,校准稳定期1天,单试剂。
同主波长项目:C3, TRF。
同样试剂分配灵敏度项目:ALB, AMY, CALA, DBIL, TBIL,CHOL, MG, UIBC, UCSFP。
对水溶气体敏感,特别是水源处理不好含有大量碳酸钙成分会导致试剂空白的增加。试剂空白P1-P9点OD变化应<0.02,否则就要维护去离子水管道和单元,还有脱气单元。血清碳酸氢盐试剂在2-8℃下暴露,只能稳定几个小时。 在仓试剂吸收大气中的CO2会影响稳定性。
采用了Fixed固定点法,1-9读点。


Calcium Arsenazo (CALA)钙

试剂稳定期90天,校准稳定期30天,单试剂。
11点出现拐点波动,所有读点为P0和P10。
同主波长项目:TRIG, UA。
相同R1分配灵敏度项目:ALB, AMY, CO2, DBIL, TBIL,CHOL, MG, UIBC, UCSFP。
相同反应杯敏感项目:BUN,CRE,DBIL,MG,UIBC。
对水质敏感,试剂空白升高、结果漂移首先考虑维护去离子水管道和单元。采用EDTA络合滴定实验确认水质。

Calcium oCPC (CA)钙
试剂稳定期30天(AU5800只有21天),校准有效期1天。
同主波长项目:DBIL, TBIL。
对水质敏感,试剂空白升高、结果漂移首先考虑维护去离子水官道和单元。
在仓试剂吸收大气中的CO2,将会影响稳定性。


Cholesterol (CHOL)胆固醇
试剂稳定期90天,校准稳定期30天,单试剂。
同主波长项目: DBIL, LDL-C, LIP, TP。
相同样品分配灵敏度项目: ALB, AMY, GLU, LIP, MG, TRIG, UCSFP, serum proteins。
相同R1分配灵敏度项目: ALB, AMY, CALA, CO2, DBIL,TBIL, MG, UIBC, UCSFP。


Cholinesterase (CHE)胆碱酯酶
试剂稳定期30天。
相同主波长项目:ALP, AMY, GGT。
R1对光敏感,注意避光。


Creatinine (CRE)肌酐
试剂稳定期7天,校准稳定期1天,最少8小时间隔质控。
相同主波长项目:MG。
相同温度波动敏感项目:所有酶、HDL-C。
相同反应杯敏感项目:BUN, CALA, DBIL, MG, UIBC。
试剂在仓暴露,易吸收空气中CO2,影响稳定性。
R1试剂对光敏感,注意避光。
这个与DXC的读点方法类似,但没有采用End法,因为AU有FIXed固定点法,所以采用固定点法,读点13-24,都在R2之后。


Creatine Kinase (CK)肌酸激酶
试剂稳定期:30天,试剂空白稳定期30天。
相同主波长项目:ALT,AST,GLU,LDH,PHOS,BUN。
相同R2分配灵敏度项目:ALT,AST,TP,TRIG,UA。
相同温度波动敏感项目:CREA,HDL-C。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Direct Bilirubin (DBIL)直接胆红素

试剂稳定期21天,校准稳定期7天。单试剂。
相同主波长项目:CA, TBIL。
相同R12分配灵敏度项目:ALB, AMY, CALA, CO2, CHOL,MG, TBIL, UIBC, UCSFP。
相同反应杯敏感项目:BUN,CRE,CALA,MG,UIBC。
试剂和样品需要避光。
这个项目原厂采用了样品空白通道方法,第一张图是样品的空白曲线,也就是样品与水按照试剂比例混合后读取的吸光度值曲线,第二张才是反应曲线,然后二者相减再进行浓度计算。这是单试剂采用的直胆检测方法。第三张图示双试剂的直胆曲线,一步完成。可以看出在原厂试剂里,直胆的反应速度很快,单试剂的读点是0-2,双试剂10-12,虽然远没有达到终点。



      

Gamma-Glutamyltransferase(GGT)谷氨酰转肽酶
试剂稳定期30天,校准稳定期30天。
相同主波长项目:ALP, AMY.
相同温度波动敏感项目:所有酶、ALP, AMY。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Glucose (GLU)葡萄糖
试剂稳定期30天,校准稳定期30天。
相同主波长项目:ALT,AST,CK,LDH,PHOS,BUN。
相同样品分配灵敏度项目:ALB, AMY, CHOL, LIP, MG, TRIG, UCSFP, serum proteins。
   

HDL-Cholesterol (HDL-C)高密度脂蛋白胆固醇
试剂稳定期30天,校准稳定期7天。
相同主波长项目:ALB, IRON, UCSFP。
相同温度波动敏感项目:所有酶、CRE。
这就是两点终点法的例子,Measuring Point-1和2都用上了,分别是0-27和0-10,其实就是10-27。

Iron (IRON)铁
试剂稳定期60天,校准稳定期30天。
相同主波长项目:ALB, HDL-C, UCSFP。
对搅拌敏感,高值结果应检查搅拌破损或污染。
对水质敏感,较高的试剂空白出现应检查处理水处理系统和管道。
对CRE和TRIG项目有携带污染的可能,注意增加特殊清洗。


LDL-Cholesterol (LDL-C)低密度脂蛋白胆固醇
试剂稳定期30天,校准稳定期7天。
相同主波长项目:CHOL, DBIL, LIP, TP。
试剂需要避光。
注意校准点的设置。


Lactate Dehydrogenase (LDH)乳酸脱氢酶
试剂稳定期30天(AU5800只有14天),校准稳定期30天。
相同主波长项目:ALT,AST,CK,GLU,PHOS,BUN。
相同温度波动敏感项目:所有酶、CREA, HDL-C。
质控存储温度在-70℃时,影响结果。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Lipase (LIP)脂肪酶
试剂稳定期21天,校准稳定期7天。
相同主波长项目:CHOL, DBIL, LDL-C, TP。
相同样品分配灵敏度项目:ALB, AMY, CHOL, GLU, MG, TRIG, UCSFP, serum proteins。
校准品是特种瓶,注意设置点和位置。
TRIG, HDL-C和LDL-C有携带污染的可能,注意增加特殊清洗。
双盘设备设置到不同的反应盘,单盘设备用CLN 100%取代针清洗剂,确认冲洗站清洗液有效。

  
Magnesium (MG)镁
试剂稳定期7天,校准有效期7天,试剂空白有效期当天。单试剂。
相同主波长项目:CRE。
相同样品分配灵敏度项目:ALB, AMY, CHOL, GLU, LIP, TRIG, UCSFP, serum proteins。
相同R1分配灵敏度项目:ALB, AMY, CALA, CHOL, CO2,DBIL, TBIL, UIBC, UCSFP。
相同反应杯敏感项目:BUN,CALA,CRE,DBIL,UIBC。
水质敏感,用滴定法测定水质借以判断,必要时维护水处理系统。


Phosphorous, Inorganic (PHOS)磷
试剂稳定期30天,校准稳定期30天。
相同主波长项目:ALT,AST,CK,GLU,LDH,BUN。
水质敏感,结果漂移应检查水处理系统。


Total Bilirubin (TBIL)总胆红素
试剂稳定期90天,校准有效期30天,单试剂。 也是采用样品空白通道法。
相同主波长项目:CA, DBIL。
相同R12分配灵敏度项目ALB, AMY, CALA, CO2, DBIL,CHOL, MG, UIBC, UCSFP。
试剂和样品需要避光。
  



Total Protein (TP)总蛋白
试剂稳定期30天(AU5800是21天)。
相同主波长项目:CHOL, DBIL, LDL-C, LIP。
相同R2分配灵敏度项目:ALT,AST,CK,TRIG,UA。


Triglyceride (TRIG)甘油三酯
试剂稳定期30天,校准稳定期30天。
相同主波长项目:CALA, UA。
相同样品分配灵敏度项目:ALB, AMY, CHOL, GLU, LIP, MG, UCSFP, serum proteins。
相同R2分配灵敏度项目:ALT,AST,CK,TP,UA。
相同的搅拌敏感项目:BUN,CRP Latex,RF Latex。
反应监测中在P11点见到不常见的波动或峰值。
对水质敏感,被甘油污染的水会导致试剂空白出现“Y”旗标,特别是维修过后。


Unsaturated Iron Binding Capacity (UIBC)不饱和铁结合力
试剂稳定期30天,校准稳定期14天。
相同主波长项目:DDIM。
相同R12分配灵敏度项目:ALB, AMY, CALA, CHOL, CO2,DBIL, TBIL, MG, UCSFP。
相同反应杯敏感项目:BUN,CALA,CRE,DBIL,MG。
R2a试剂可能对R2造成携带污染,注意搅拌系统的破损和清洗。并注意瓶间差造成的质控和结果不稳定。
相同搅拌敏感项目:IRON。

Urea Nitrogen (BUN)尿素氮
试剂稳定期30天(AU5800是14天),校准稳定期14天(AU5800是7天)。
相同主波长项目:ALT,AST,CK,GLU,LDH,PHOS。
相同反应杯敏感项目CRE,CALA,DBIL,MG,UIBC。表现在高吸光度区域测量变化值很小。
相同搅拌敏感项目:TRIG,CRP Latex,RF Latex。P11点出现异常波动或峰值,应检查搅拌棒高度和破损。
相同温度波动敏感项目:所有酶、CREA, HDL-C。
出现“*”旗标,检查光源、光度计校准和反应杯溢流(漫盘)。


Uric Acid (UA)尿酸
试剂稳定期30天,校准稳定期30天。
相同主波长项目: CALA, TRIG。
相同R2分配灵敏度项目:ALT,AST,CK,TP,TRIG。
水质敏感。结果不稳定,过高的试剂空白应维护水处理系统。

漫盘指示项目的曲线
漫盘影响所有的测试结果,但有如下项目最为敏感,所以成为漫盘指示项目,观察这些项目的曲线成为判断漫盘的一个依据,这些项目出现这样的曲线时,应注意漫盘现象的产生。
DBIL 直接胆红素、TBIL 总胆红素、CP 血浆铜蓝蛋白、CHOL 胆固醇、CREA 肌酐、CRP C反应蛋白、GLU 葡萄糖、
IRON 铁、MG 镁、PH 磷、TP 总蛋白、TG 甘油三酯、UA 尿酸。
漫盘的特征:
R1添加时的吸光度高,第一读点P0出现峰值,P1到P5逐渐回落;
R2添加时也会出现峰值,一般是P11、P12、P13,主副波长都会受到影响,反应曲线(主波长-副波长)可能会趋于正常。
AU640的Tbil 总胆红素,前图正常,后图漫盘,以下雷同。
   


AU2700/5400的CHOL 胆固醇

   


AU680/480的CRP C反应蛋白

   


AU2700/5400的GLU 葡萄糖
   



AU2700/5400的IRON 铁
   



AU680/480的TP 总蛋白
   



AU400的CRE 肌酐
   



AU2700/5400的CRE 肌酐



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