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[分享] 采用速率法定标曲线什么样子

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chuxiao 发表于 2017-12-11 17:42 | 显示全部楼层 |阅读模式

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求大神指导,采用速率法定标曲线什么样子?横纵坐标各代表什么?

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郑振寰 发表于 2017-12-11 19:38 | 显示全部楼层
校准曲线与速率法没有任何关系,你到底要问什么?
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 08:27 | 显示全部楼层
我想问的是使用速率法如何通过校准曲线计算得到所检测物的测量值
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 08:40 | 显示全部楼层
郑振寰 发表于 2017-12-11 19:38
校准曲线与速率法没有任何关系,你到底要问什么?


我想问的是使用速率法如何通过校准曲线计算得到所检测物的测量值
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 09:54 | 显示全部楼层
chuxiao 发表于 2017-12-12 08:40
我想问的是使用速率法如何通过校准曲线计算得到所检测物的测量值

纵坐标应该是斜率,而不是吸光度
郑振寰 发表于 2017-12-12 10:10 | 显示全部楼层
不明白你到底要做什么。
速率法是检测方法,最终得出的是吸光度变化率。
校准曲线有自己的公式,是吸光度变化率和浓度之间的关系,不管你用什么方法得到的吸光度或吸光度变化都可以计算。所有的校准曲线的纵坐标都是吸光度,横坐标都是浓度。你是不是把线性校准曲线当成什么速率法看了?
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 10:23 | 显示全部楼层
本帖最后由 chuxiao 于 2017-12-12 10:43 编辑
郑振寰 发表于 2017-12-12 10:10
不明白你到底要做什么。
速率法是检测方法,最终得出的是吸光度变化率。
校准曲线有自己的公式,是吸光度变 ...

通过速率法得到吸光度变化率,如何计算出浓度?就是变化率和浓度是如何对应关系,通过校准曲线计算吗校准曲线是浓度-吸光度关系,速率法得到的是吸光度变化率是吸光度-时间关系,,他们之间如何建立联系?
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 10:46 | 显示全部楼层
chuxiao 发表于 2017-12-12 10:23
通过速率法得到吸光度变化率,如何计算出浓度?就是变化率和浓度是如何对应关系,通过校准曲线计算吗校准 ...

C:\Users\jxq\Desktop\吸光度.png
这是abx micro crp 200 的定标曲线,纵坐标是吸光度的变化

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郑振寰 发表于 2017-12-12 11:14 | 显示全部楼层
你先搞清楚什么是反应曲线,什么是校准曲线再来想这个问题。
反应曲线是通过速率法或终点法得到反应吸光度或速率,校准曲线是通过吸光度或速率换算成浓度,是两个不同的步骤。
你所给出的ABX CRP的校准曲线示意图,我很熟悉 ,你根本没有看懂手册上给出这张图的说明。再说这张图上根本不是什么速率法,因为用的是免疫比浊法,对应的是终点法。手册上还有一张反应曲线,相信你该看过。
所谓的纵坐标是斜率是你的误解,其实还是吸光度,只不过是ABX单独演算过的罢了。因为每次反应要读点多次,每次间隔10秒,系统自动寻找比较平稳的两点间浓度作为反应终点值进行计算。而在校准曲线上,每两次读点形成的斜率作为纵坐标,其实本质还是吸光度。这是一个自定义变种而已。
你该好好看看生化免疫反应中的反应曲线和校准曲线,而不要纠结这一个特例。至于什么速率法校准曲线的说法太令人无语了,基础的词汇还是要使用正规语言的好,不要自造词汇,也不要想当然。
看贴要回是本分,有问必答是人才,解决问题回贴是公德.
医疗设备维修.维修咨询(请尽可能在论坛提问),协助维修,上门服务.
电话:13991827712
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 11:24 | 显示全部楼层
本帖最后由 chuxiao 于 2017-12-12 11:37 编辑
郑振寰 发表于 2017-12-12 11:14
你先搞清楚什么是反应曲线,什么是校准曲线再来想这个问题。
反应曲线是通过速率法或终点法得到反应吸光度 ...

非常感谢您的回答?有一点还是不明白,按照您所说的所有的校准曲线的纵坐标都是吸光度,横坐标都是浓度能讲细点校准曲线是如何通过速率换算成浓度?
反应曲线是速率法得到速率,如何计算出检测物浓度?

郑振寰 发表于 2017-12-12 12:56 | 显示全部楼层
反应曲线得到吸光度,校准曲线得到浓度。
反应曲线可以由速率法也可以由终点法生成。得到的吸光度或速率在反应曲线上找相应的吸光度,对应的横坐标就是浓度。
这是两个步骤,一定要搞清楚,只有在反应曲线这一步才有什么速率法终点法,在校准曲线这里根本不管这些,只要有吸光度就能算出浓度。
babara191 发表于 2017-12-12 13:25 | 显示全部楼层
校准是给机器一个定义,到这个吸光度浓度应该读多少,而测试是机器测得吸光度,根据校准得到的吸光度和浓度的曲线得出溶液的浓度,不是根据什么速率得到的。速率法是溶液试剂反应浓度随着时间的推移成一定的斜率,这是反应方法,和校准曲线没有关系,校准曲线是不同浓度在一定的时间里反应所测得的吸光度的连线。
 楼主| chuxiao 发表于 2017-12-12 15:12 | 显示全部楼层
郑振寰 发表于 2017-12-12 12:56
反应曲线得到吸光度,校准曲线得到浓度。
反应曲线可以由速率法也可以由终点法生成。得到的吸光度或速率在 ...

谢谢您的耐心回答,这点我明白了
今晚打豹子 发表于 2017-12-12 19:53 | 显示全部楼层
校准品是已知浓度的,最少两个校准品,一个低值,一个高值,与试剂校准后。低值校准品与试剂反应后得到一个吸光度,记录下来,高值校准品与试剂反应后得到一个吸光度,记录下来。在坐标系中,0浓度为原点,纵坐标把刚刚测得的两个吸光度记录在坐标里,然后横轴上把两个已知浓度的校准品记录在横坐标上,比如说低值校准品浓度是5,高值是18,与试剂反应后测得的吸光度,低值是3000abs,高值是9000abs。就可以在坐标系中表示出一条线了,系统会有相应的算法,计算出一条曲线,这个就是校准曲线。标本检测的时候,标本浓度是未知的。标本血清与试剂反应后,会得到一个吸光度。此时会有一个反应曲线,横轴表示读取吸光度的时间,纵轴表示吸光度。此时得到的吸光度在校准曲线纵坐标上对应出来。就有一个横轴对应的浓度点 C,然后根据浓度公式就可以计算出来了。file:///C:\Users\Administrator\AppData\Local\Temp\ksohtml\wps9E82.tmp.jpgfile:///C:\Users\Administrator\AppData\Local\Temp\ksohtml\wpsF2D8.tmp.jpg
今晚打豹子 发表于 2017-12-12 20:00 | 显示全部楼层
本帖最后由 今晚打豹子 于 2017-12-12 20:02 编辑

发重复了。
有情 发表于 2017-12-12 21:06 | 显示全部楼层
论坛上很多这方面的帖子,搜一下
topmingri1111 发表于 2018-6-18 10:59 | 显示全部楼层
学习了
旭灬旭 发表于 2018-8-3 16:08 | 显示全部楼层
很详细的。
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