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[讨论][原创]ABX PENTRA60 LMNE问题综述--鞘流调整

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郑振寰 发表于 2005-7-5 21:09 | 显示全部楼层 |阅读模式

ABX PENTRA60 出现下列问题

LMNE为0

LMNE极端不平衡,lym可以达到90%,MON要在10%左右,EO和GRA均为0,

图形严重离散,根本无法区分三个主要的群

图形严重聚集,根本无法区分三个主要的群

图形严重压缩在一侧,一般是在左侧,下部,很少会出现在上部和右侧的。

屏幕显示LMNE的数值后面有大量的提示*!等等

屏幕FLAG有大量的提示LL L1 AL LIC ALY等等

下面就上述现象进行阐述,要说明的是,仅供参考,按照此操作后果自负。


首先,要确认是否是嗜酸(EO)试剂问题,国产的此类试剂我见过很多都不错,三得,卓越,雷诺华等,贝索和荣美据说也不错,但我没有见过使用,不好说什么。出现这种问题一定要先更换一个批号的嗜酸(EO)试剂,发现雷诺华的用户出现上述问题,嗜酸(EO)试剂剩余一半,观察峭流池的6号管道发现,液体居然是铁锈颜色的,感觉不对,更换新的批号恢复正常(浑浊蓝色),询问操作员才知道,每次用过的嗜酸(EO)试剂好几瓶的瓶底儿倒在一起,理由是一个厂家的不应该有什么问题,呵呵,问题恰恰出在这里。这是因为嗜酸(EO)试剂和标本混合孵育后,标本被染色,但无论如何不会成为铁锈红色的,有些仪器使用久了会出现管道沉淀,无法观察,建议及时更换。

第二、检查LMNE混合池的两个试剂注入管道是否堵塞和脱落,造成试剂量不够

第三、下面的管道注意更换和检查

上图的红线部分,使用正常的时候,这些管道应该是浑浊蓝色,如果沉淀性发白就必须更换,并且要怀疑试剂造成的。


上述红线部分一样要重视。

第四、在排除了嗜酸(EO)试剂问题后,进入工程师菜单进行下面的检查。

进入tersurememt\lmne adjustment菜单,用新鲜血液标本替代乳胶颗粒,测试过程中会出现下列参数

LMNE LAMP一项应该在6V(5.5V----6.5V之间都算正常),如果不在这个范围请更换灯泡或清洁光路系统(调整接收器后面的放大板上的电位器R11可以使这个电压符合要求,在这个板子上有两个测试点,和一个电位器,调整这个电位器使这两个测试点之间的电压为6v就可以了)。

TRANSFER TIME 传送时间应该在200ms(150----250ms)仔细观察这个参数。

RESISTIVE CHANNEL 阻抗通道应该在50(45----55 )仔细观察这个参数。调整R136

ABSORBANCE CHANNEL吸光度通道应该大于170,仔细观察这个参数。调整R148

如果TRANSFER TIME在测试过程中大部分时间为0,但是偶尔能够出现100以上的数值,但是时间很短,在最终结果上这个数值是0,配合观察鞘流池发现(取下鞘流池屏蔽罩)激光部分根本就不出现闪烁,或者偶尔出现一下,且ABSORBANCE CHANNEL数值总是在10不发生变化,那么可以断定鞘流堵孔。且这个时候标本图形压缩在底部或者左侧。

下面讲述一下鞘流排堵。


取下鞘流泵右侧活塞的侧面管道(就是上图打叉的地方),接上注射器,这个管道就是图中1号管道,也就是主鞘流,夹住图中的2号管道,一定要在这个位置夹住,轻推注射器,会感到阻力甚至推不动,说明鞘流孔堵塞,反复拉推注射器排堵,如果堵塞严重,可以拆卸鞘流池下来进行处理。

拆卸鞘流池的两个定位螺丝,将鞘流池倒置,拔下6号管道插入带有加样头的注射器,加样头正好可以接到6号口的金属接头上,这个过程要小心,否则会把内鞘脱落。将鞘流池出口管道拔下,用1号注射器在红色的鞘流孔上部注入次氯酸钠溶液,注意要小心不要扎破鞘流孔,鞘流孔的下部由带有加样头的注射器从6号口注入,注意这个过程中,2、5、7、4号 管道不要拔下来,这样浸泡10分钟左右,在6号口用注射器推拉,拉的幅度要大于推的幅度,这样反复几次就可以排除堵孔。安装鞘流池的时候,一定要注意6号管道的连接可靠,这个接头很特殊,限制速度和压力,不能随便替换,不能歪斜,在紧固螺丝之前一定要反复确认是否连接好,在随后的测试中如果出现传送时间报警,就是这个管没有接好或者干脆脱落。安装好鞘流池后,进入tersurememt\lmne adjustment菜单,用新鲜血液标本替代乳胶颗粒,测试TRANSFER TIME 和ABSORBANCE CHANNEL,这个时候TRANSFER TIME 应该稳定在150-250之间,ABSORBANCE CHANNEL应该在25左右,说明排堵成功,观察鞘流池可以发现激光大量的频繁的闪烁,且RESISTIVE CHANNEL由原来的65以上降为 48左右,说明恢复正常。

这个时候做新鲜标本测试。观察图形,是否继续压缩或者偏移,然后进行下面的调整。

第五、 检查和清理处理鞘流泵,液体分配泵,注意密封圈和管道接头还有电磁阀的接头。这里不在多说。

第六、 检查和调整主板下列地方:

起始点:WBC/BASO 起始点: 调整R157使TP14的电压为300mV+-5

                 RBC 起始点:调整R158使TP13的电压为300mV+-5

                 PLT 起始点:调整R159使TP2的电压为300mV+-5

                 LMNE CIS 起始点:调整R160使TP3的电压为650mV+-5

                 LMNE OD 起始点:调整R161使TP4的电压为350mV+-5

马达控制电压:

排空注射器马达  调整R149使TP5点的电压为4V +-0.05V

计数注射器马达  调整R150使TP6点的电压为4V +-0.05V

试剂分配注射器马达  调整R151使TP7点的电压为4V +-0.05V

鞘流分配注射器马达  调整R152使TP8点的电压为3V +-0.05V

采样针水平移动马达  调整R154使TP10点的电压为3V +-0.05V

采样针纵向移动马达  调整R155使TP11点的电压为2V +-0.05V

采样针注射器马达 调整R156使TP12点的电压为5V +-0.05V


第七,用同一个新鲜标本配合观察图形调整激光接收和鞘流池位置:


保证水平调整螺丝不移动,仅进行纵向调整,纵向调整螺丝每次超一个固定方向调整1/5圈,一定要记住方向,每调整一次测试标本一次,观察图形,第一步按照这个办法先调整出拉开的图形,如原来在底部的,调整到左侧很高的图形,只要调整出很高的图形,就不要继续调整了,暂时记住这个位置,然后配合主板调整。

R136电位器左右旋转可以将图形按照轴线进行左右移动,这个范围很宽,如果图形压缩在左侧,可以顺时针旋转4-5圈调整图形到中间位置,然后根据图形的离散情况,调整R148使图形聚集或者离散,调整的最终目的,是图形清晰的区分出来,且三个主要的群分部在三个主要的界标范围内,并且AYM和LIC还有EO不能出现过高的情况,数值没有报警提示为原则。

R136,R148,纵向调整螺丝,水平调整螺丝,这四个关键部位的综合配合调整才能最终调整最佳状态。

第八、解释一下关键的地方:

TRANSFER TIME是细胞经过鞘流孔后到达且被激光检测到的时间,这个时间规定在150-250ms之间,最好在200ms,如果堵孔,在规定的时间内没有检测到,那么这个时间就为0,如果6号管道接口限流限压接口替换为不合适的,那么在很短的时间内就通过了激光,这个时候激光还没有开启接受,这个时间也是0,或者认为是气泡被滤除掉,如果鞘流池的位置偏移,主鞘流通道(42um)不在发射器接收器中轴线上,那么虽然被小孔检测到,但没有被激光接收到,也不会有这个信号,那么没有接收就不会有ABSORBANCE CHANNEL吸光度值,这两个参数是相关的,而RESISTIVE CHANNEL由于堵孔等因素影响会很高,所以,这三个参数可以反映出鞘流池的工作状态是否最佳。

还有就是图形问题,一定在调整的时候不要通过电脑接收软件来作为调整参考,直接将打印机接到仪器上,根据原始的图形进行比对,发现不少软件的图形和界标关系混乱,根本不能作为调整依据,在我进行调整的多台设备中居然发现一个接收软件自做聪明的把LMNE界标线作成浮动的,人为的去寻找三个主要群的分布,这样会产生很好的视觉效果,虽然不改变数值,但作为如此重要的调整参照是绝对不可以的,不过还是佩服这个程序的编制者 ,功夫下错了地方,有蒙骗的嫌疑。

整个处理过程,排除堵孔、更换相应的管道,调整鞘流,根据熟练程度,一般在4-12小时之间,其间的风险很高,经验十分重要,这也是做这个处理价格高昂的原因,任何五分类的激光调整,一般在8000-30000元之间的收费,所以,没有把握不要去尝试,除非有练手的机器。下面的跟贴是一个调整过程的图片说明,过几天发布,请留意。


[此贴子已经被作者于2005-11-10 14:56:07编辑过]

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 楼主| 郑振寰 发表于 2005-11-10 12:50 | 显示全部楼层


R136 调整RESISTIVE CHANNEL 阻抗通道应该在50(45----55 )。


R148调整ABSORBANCE CHANNEL吸光度通道应该大于170,需要乳胶颗粒。

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韦涛 发表于 2008-2-28 14:50 | 显示全部楼层
没有乳胶颗粒,用新鲜血可以不?
Victor 发表于 2008-2-28 14:56 | 显示全部楼层
好贴,经典。
 楼主| 郑振寰 发表于 2008-2-28 15:08 | 显示全部楼层
以下是引用韦涛在2008-2-28 14:50:00的发言:
没有乳胶颗粒 用新鲜血可以不

可以,只不过ABSORBANCE CHANNEL吸光度通道的值没有那么高,仅仅在70-90之间。

fangzhuncsu 发表于 2008-5-25 07:59 | 显示全部楼层
好东西,值得学习!
林小强海南 发表于 2008-6-7 03:35 | 显示全部楼层

1.ABSORBANCE CHANNEL吸光度通道应该大于170

2.ABSORBANCE CHANNEL应该在25左右

郑老师上面资料中的170和25 看哪个是正常的呢 ?我调光路了,用新鲜血液做出25左右还需要调整光路吗?我现在遇到一台机器和你分析的情况一模一样的。 谢了

王淼 发表于 2008-6-7 08:54 | 显示全部楼层
真是好文章.
朱迎新 发表于 2008-6-26 11:58 | 显示全部楼层

谢谢斑竹的分析

 

 

老驼 发表于 2011-12-20 22:21 | 显示全部楼层

好文章,谢谢郑工。图文并茂。

苏鉴波 发表于 2011-12-27 00:44 | 显示全部楼层
学习中
Winlab 发表于 2011-12-27 08:58 | 显示全部楼层
好文章
邹云堂昆明 发表于 2012-3-13 11:00 | 显示全部楼层
太好了,很受用。
齐家良 发表于 2015-9-28 14:53 | 显示全部楼层
辛苦了,谢谢。
wangxiaoyiken 发表于 2016-7-18 16:08 | 显示全部楼层
经典,总结的好到位
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