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[原创]ABX PENTRA系列的问题综述5---LMNE问题

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郑振寰 发表于 2007-7-24 23:05 | 显示全部楼层 |阅读模式

1、所有LMNE结果%和#都带有星号:

首先检查EO试剂,更换一下,以免各种原因的污染;程序清洗鞘流池,手工清洗鞘流池,检查鞘流池的两个信号线和相关管道的接地管是否可靠。检查鞘流泵密封情况,检查LMNE池传送情况。如果标本的散点图都不错的话,调整一下界标,在菜单SETUP--LAB.LIMITS--THRESHOLDS里面。

2、%正常,#有星号,这是由于WBC总数有*号的原因,参照WBC处理。

3、散点图正常,但偏移在一侧,要么在左侧,要么在右侧,要么在下部,要么偏上,这是电阻通道(R136)或传送时间(R148,这个传送时间不是传送传感器的时间,是鞘流池电阻法和光学法衔接的时间)监测出现问题,需要调整,在菜单MAINTENANCE--TECHNICAN--MEASUREMENT--LMNE ADJUSTMENT里面,需要乳胶颗粒校正。下图是正确的结果:


如果第2项传送时间和第三项电阻通道的数值跳动很大,一会儿在正常范围,一会儿超出正常范围,一会儿又低于正常范围,这个情况下不要做调整,检查乳胶颗粒混匀和鞘流泵、鞘流池以及LMNE池的传送后再说。

4、如果上图中第2项传送时间和第三项电阻通道的数值分别为100和5,第4项ABSORBANCE CHANNEL吸光度通道固定为10,那么说明几点,一是乳胶颗粒没有吸入,空吸了,二是传送没有完成,三是鞘流泵及相关电磁阀有问题,四是鞘流池下的6号口管道脱落了。

5、如果上图中几项偶尔变化一下,然后固定在左侧不动,排出了上面4的原因后,就是堵孔了,需要清洗内鞘小孔了。

如果鞘流池不在光路范围内,例如左右偏离光路,或者前后距离过大,也会出现此类情况,这种情况不会无缘无故发生,一定是动过了才这样,还是那句话,没病不死人。

6、图形混乱,无法分清楚三个群。每个标本都是如此的话,除了检查堵孔,鞘流泵和鞘流池有无管道脱落泄漏外,就需要进行鞘流调整,下面跟贴会解释。

7、图形稀少,但WBC总数正常,甚至偏高。在确认WBC总数是准确的情况下,检查LMNE的传送情况,看下图:


上图4个步骤,注意看中间那个LMNE池,开始分配标本的时候,标本与EO试剂混合,到达3号口(红色口)的上部也就是步骤1,开始孵育,12秒以后,注入稀释液缓冲,液面到达步骤2的位置。这是鞘流泵下拉,吸取LMNE的液体通过4号阀、T2三通、进入鞘流泵,实际上这些液体并没有进入鞘流泵,都在这段管道里面了,当液面低于LMNE池的3号口时,空气混入,传送传感器监测到气泡,传送就会停止也就是步骤3,30号阀和废液泵动作,将剩余的液体排空,然后注入稀释液冲洗,就是步骤4。在这个过程中,如果传送传感器阈值错误或者接收管不好了,就会出现在步骤3时液面下降一点儿,还没有到达3号口时就停止传送,大量的液体被废液泵吸走了。这里首先肯定的是传感器没有完全损坏,否则就会报传感器错误了,是阈值出现问题了,阈值过低,到只有液体和无液体界限不明,程序误动作。更换传感器是个不错的办法,不参考电压,而是将有水指示灯调到刚亮再过一点点,是个替代的办法。这个时候有水电压一般都高于1v,说明传感器性能下降了或者匹配有问题。由于传感器的问题,导致传送的液体太少,那么结果的散点图自然稀少了。还有一个就是根本没有调整好图形,这一般是在调整的时候出现的问题。

8、FLAG过多。AL\LL\LL1\L1\No\RM\ALY\LIC等等,一大串FLAG,如果是单独的标本,请立即镜检,如果是大批量的,除了按照上述的检查外,就出要进行鞘流的清洗和处理甚至调整。下面会跟贴说明。


9、LMNE+和LMNE-,这是鞘流电阻通道根据电阻计数通过稀释比例换算后与WBC/BASO池纯电阻法得出的WBC比例比较的结果。这个结果是以鞘流通道为依据,鞘流通道的白细胞总数低于WBC通道一定的范围,那么报LMNE-。反之,报LMNE+。但WBC总数以WBC/BASO通道为准,屏幕上和报告上显示的也是WBC/BASO通道的数值。这里的提示是提醒你结果并不是很可靠,若鞘流通道不可靠,则结果勉强可以报,若WBC/BASO通道结果不可靠则不能报,需要自行判断。

一般是由于采样针的移动出现问题,WBC分配标本太少,或者传送传感器出现问题,造成传送过少造成的。如果是调整光路或者分类过后出现的,那就是调整不好,需要重新作。总是出现固定的-或者+,排除前面集中可能后,通过定标来解决,定标菜单里面就有关于LMNE的定标系数,范围从0.8--1.2之间,依然是乳胶颗粒校正。


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 楼主| 郑振寰 发表于 2007-7-24 23:52 | 显示全部楼层

鞘流的调整和检查,前提条件很多,首先是合格的试剂,乳胶颗粒和原厂质控,新鲜血标本。

请先看这篇文章,https://www.yeec.com/forum.php?mod=viewthread&tid=3628&replyID=&skin=1,进行调整前的检查和处理,确有必要调整,再看下一篇文章,https://www.yeec.com/forum.php?mod=viewthread&tid=4906&replyID=&skin=1如何调整鞘流池的位置和灯泡调整等等,好像很少遇到这么全面的问题,我倒是经常遇到,在医院里很少,都是别人调乱了我来扫尾遇到的。

鞘流池的拆卸就不说了,找不到图片了,估计也很少有人遇到,无非是拆卸螺丝罢了,螺丝经常生锈不好拆,不要问我怎么拆螺丝阿,不够闹心的。拆卸鞘流池后,主要是清洗内部,光路通过的部分内外侧不能有划痕,内侧不能有腐蚀或者磨损,至于怎么出现的磨损,问问你们的试剂厂家和维修工程师。为什么目前所有的五分类光学鞘流池都没有任何清洗剂参与?无论是塑料的,有机玻璃的,石英玻璃的鞘流池都没有任何清洗剂的参与?就是因为清洗剂对池子内壁的损伤太大了,想想三分类HGB池吧,次氯酸钠。84泡了一两年都完蛋了,别忘了,那个光线要求不严格的,鞘流是要看细胞的颜色的,对光线的要求很严。我们的试剂厂家或者工程师可不管这个,次氯酸钠,84,清洗剂,什么都敢上,外鞘光路部分居然能泡出褐色的磨损伤痕,光线如何通过,通过后如何识别细胞的微弱颜色变化?当时可能疏通了,但后果呢?一个池子曾经问过,差不多要3万,还不算安装调整的费用。得不偿失,也奉劝那些试剂厂家和所谓的工程师,下手不要太狠。 如果严重堵孔,拆卸下来后,把内鞘单独浸泡那倒是可以的,安装前一定要冲洗干净。安装的时候注意水平和密封,鞘流池一旦泄漏就什么也干不了了。外鞘主要是注意内壁的清洁,挂壁现象的处理,挂壁主要是气泡产生的根源,气泡又是分类不好的主要原因。

参看这个实际照片,首先将发射聚焦镜筒位置摆正,什么叫摆正呢?要与鞘流池和接收聚焦镜筒在同一个平行面上,这里,暂且将鞘流池目测摆正,然后,将白卡纸放到鞘流池与接收聚焦镜筒之间,从灯泡位置透过鞘流池看白卡纸上的灯丝及光圈,光圈要椭圆,灯丝与水平面垂直,将发射聚焦镜筒调整到这个样子后,用3mm塞规固定发射聚焦镜筒于鞘流池的距离是3mm,然后暂时固定。就有人给我打电话,“没有3mm塞规怎么办,眼看不准阿”。简直混帐,不动脑子,你拆卸机器不是用3mm(3分类3mm是主要的螺丝,五分类计数池等上的螺丝也是3mm) 和4mm的六角扳手,扳手上两水平面的距离就是3mm,把扳手放在中间移动发射聚焦镜筒不就可以了吗?反复验证光圈和灯丝以及鞘流池平面与发射聚焦镜筒的平行度,然后固定住发射聚焦镜筒和鞘流池,暂且将接收镜筒与鞘流池的位置固定在4mm上,也可以用扳手阿。接收镜筒的水平不用管,因为本身后部就是平面的,想不水平都不行。注意的是,用扳手测量距离的时候,千万不要划上鞘流池外壁阿,否则也是报废。

然后按照下面做法开始调整。

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 楼主| 郑振寰 发表于 2007-7-25 00:35 | 显示全部楼层

,我说的这种情况是完全调整乱了的情况,大家在实际运用过程中很少遇到,我完整的说出来,大家看明白之后可以根据情况节选。

1、将LMNE的电阻通道和光学通道的阈(再说一遍,这个字念yu,遇的同音,不是电磁阀的阀,看准了不要用错了)值调整准确。

2、用示波器将下面2个电位器调整准确:



3、将鞘流池水平螺丝目测调整到中间位置,方法看前面的帖子连接。

4、用新鲜标本(最好是同一个人的,正常人的,4-6ml,同时采集同时抗凝到2-3个采血管中,不间断的混匀),这里为什么要用新鲜血标本而不用乳胶颗粒或者质控,因为它们太贵了,我想节省点儿。 在STARTUP测试通过后,做第一个标本测试,看看散点图的情况,然后调整鞘流池前后螺丝,将散点图尽可能的集中,最后配合鞘流池左右螺丝,将散点图调整到最清晰,左右螺丝移动距离很小,前后稍后大一些。集中的图形可能在散点图的任何位置,不去管它,先让它集中最清晰,然后再去处理,不去管它是否合理。

我的调整过后的最清晰的图形式这个样子:


这是聚焦后的样子



这是尝试顺时针调整R136后的初步样子



这是调整R136最清晰的样子。



这是初次顺时针调整R148的情况



这是最清晰的R148调整



这是R148调整过了。

初步调整过后,发现光路没有调整正确,重新调整前后螺丝:


这是第一次尝试

调整过了,横切割线出现。

找回来了。

然后再进行R136R148调整:


第一次尝试

第二次尝试

调整过了。

差不多了。

然后进入 LMNE adjust调整里面,用乳胶颗粒反复将传送时间和电阻通道调整到最佳状态。

在前面的调整过程中,反复检查采样针状态,试剂泄漏情况,试剂情况和本底情况,否则一旦不正常,你的调整就白费了。调整了三张比较清晰的图。


这张三个群较明显,但横切线隐约出现,出现LMNE+,PLT出现*号不要去管,因为电极线有问题了,暂时没有管。

这张WBC出现*号,图像不错,EO有些高,提醒医院镜检配合,结果三个人分别数100、200、300个细胞,EO的结果分别是6、8、15,差不多。可怜的是这个标本是我的。

这是最终的结果。

这是经过质控和界标线调整后,用PS着重黑色后的图形。


这是一张最后的质控图形,用来定标的,感觉不对吧?其实进口质控就是这样样子,三个群理论上应该在三个不同的区域,但这么多年,我所见到的都是这样的,如果强行把它分成三个区域,那么人的标本就没法看了,分类也就乱了。再看WBC/BASO的直方图,简直混乱异常,与三分类的进口质控一样,没法参照图形,试剂问题?使用环境?质控失效?不得而知,明明在有效期,我开的瓶呢。

定标后,各项参数和分类项目在靶。做了60个随机门诊常规,与老师们的镜检比对吻合,只有3例BASO差别很大,镜检发现与提示的LIC符合,2例EO异常,镜检发现与Ne提示符合。

这就是调整的大概过程,能仔细看完看明白了,就会调整,看不明白,也不要电话问我,我实在厌烦了类似询问顺时针是往左拧还是往右拧的问题了。电话里面语言不同,腔调不同,还是不聊这么细致的问题为好,都省点儿精力省点金钱吧。




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zfb55555 发表于 2007-8-5 22:47 | 显示全部楼层

好帖!!

fuyongwei 发表于 2007-8-6 14:16 | 显示全部楼层
   真是太好了!详细!!!谢了
随便看看 发表于 2007-8-31 10:26 | 显示全部楼层
太仔细了!!!!
tystys 发表于 2007-11-22 12:40 | 显示全部楼层

老大真是我们学习的榜样.

许世宏1 发表于 2008-2-23 07:44 | 显示全部楼层

好文章好帖

kuaizaifeng 发表于 2008-2-23 10:58 | 显示全部楼层
谢了,太详细了。能多发些实物图吗
许世宏1 发表于 2008-3-8 20:27 | 显示全部楼层

看过再看一遍还是有新的收获。

sky_kobe 发表于 2008-5-20 19:47 | 显示全部楼层
好贴,顶一下
朱迎新 发表于 2008-6-26 11:17 | 显示全部楼层
有收获啊
冀静静 发表于 2017-4-13 09:02 | 显示全部楼层
好贴
Fensun 发表于 2022-11-27 16:49 | 显示全部楼层
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